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技術(shù)文章

BIM小課堂:ELISA試劑盒實驗OD值的范圍?

點擊次數(shù):15480   發(fā)布時間:2016/10/18 10:37:19

    elisa試劑盒實驗OD值是optical density(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度,是檢測方法里的專有名詞,檢測單位用OD值表示,1OD=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。 光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
   ELISA試劑盒實驗*后步驟中OD值的范圍也是有一定講究的,不容小覷。說到OD值范圍,我司業(yè)務(wù)員在售后問題的處理過程中也常會有客戶咨詢其范圍是多少。其實是不一定的,我們以AβELISA為例,2以上就會偏飽和,變化不容易做出來,所以一般把model組控制在0.8-1.5,而control組的話基本跟空白差不多,不到0.1。
   所以,一般情況下我們會建議先做個標(biāo)曲以及樣品的梯度稀釋,然后選擇在標(biāo)曲中間位置的樣品稀釋度作為以后的參照稀釋度。
    同時,也與使用的detector有關(guān),detector有自己的檢測范圍和線性范圍。如果實驗室使用的儀器,說明書上說檢測范圍是0~4,線性范圍是0~3,但我們自己的實驗結(jié)果顯示的線性范圍是0~2OD。如果只檢測空白的沒有經(jīng)過處理的Elisa孔,大致在0左右。
    HIV抗體ELISA法測定中空白OD值大于陰性對照OD值是什么原因,單波長下和雙波長下測定無明顯改變空白做的是試劑空白,不加酶,只加顯色劑和終止液,陰性對照是試劑盒提供的不用稀釋。450nm下測定和450/630nm下測定空白,沒明顯差別。
 

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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